Bulvių dekstrozės agaras (PDA) yra gera bendrosios paskirties pusiau kieta terpė, naudojama grybeliams auginti. Jis dažnai naudojamas grybus formuojančioms rūšims išskirti, auginti ir prižiūrėti. Galima įsigyti paruoštų Petri patiekalų ar mėgintuvėlių, kuriuose yra PDA, arba PDA greitai pagaminti naudojant komercinį premiksą. Tačiau nėra paprasta padaryti paprastą ir efektyvią versiją nuo nulio už nedidelę kainą.
kreditas: Visiškai priklausanti „Zedcor“ / PhotoObjects.net / „Getty Images“Bulvių ekstrakto paruošimas
1 žingsnis
Įdėkite bulves į lėkštę su maždaug 1,2 litrais vandentiekio vandens ir virkite ant viryklės 1 valandą.
2 žingsnis
Nuimkite puodą nuo ugnies ir leiskite skysčiui atvėsti, kol jis bus patogiai naudojamas (maždaug 10 minučių).
3 žingsnis
Skystą bulvių ekstraktą perpilkite per sietelį ar varškę ir surinkite į kitą indą.
Vidutinio paruošimas
1 žingsnis
Įpilkite dekstrozės ir agaro į 1 litrą bulvių ekstrakto vandens.
2 žingsnis
Ištirpinkite tirpalo pH pH bandymo popieriumi arba pH matuokliu.
3 žingsnis
Jei pH yra didesnis kaip 6,5, sureguliuokite jį, pridėdami po vieną lašą druskos rūgšties tirpalo ir pakartotinai atlikdami bandymą.
4 žingsnis
Jei pH yra mažesnis nei 6, sureguliuokite jį, įlašindami po vieną lašą natrio hidroksido tirpalo vienu metu ir dar kartą atlikdami bandymą.
Sterilizacija
1 žingsnis
Kruopščiai sumaišykite terpę ir padalinkite ją į mažesnes 250 ml dalis, supilamas į keturias 500 ml kolbas (pastaba: kiekviena kolba turi būti ne daugiau kaip pusė užpildytos, kad neužvirstų).
2 žingsnis
Kiekvieną kolbą uždenkite laisvai susuktos aliuminio folijos gabalėliu, kad folija nenukristų, tačiau neužsandarintų.
3 žingsnis
Kolbos dedamos į greitpuodį.
4 žingsnis
Įjunkite slėginę viryklę pagal gamintojo instrukcijas, kad 15 minučių sterilizuotumėte PDA 121 laipsnių C (250 laipsnių F), esant 103 421 Paskalio (15 PSI) slėgiui.
5 žingsnis
Išjunkite slėginę viryklę ir leiskite jai grįžti į atmosferos slėgį, tada išimkite kolbas ir leiskite joms atvėsti, kol jas bus galima naudoti.
Pilstymo terp
1 žingsnis
Sterilius Petri lėkšteles ištieskite ant lygaus paviršiaus.
2 žingsnis
Kolboms atvėsus iki darbinės temperatūros, bet prieš tai, kai terpė pradeda kietėti, viena ranka suimkite kolbą, kita ranka nuimkite ir atidėkite jos folijos dangtį.
3 žingsnis
Kiekvienai „Petri“ lėkštelei viena ranka pakelkite dangtį, greitai iki pusės užpildykite skystu PDA ir uždarykite dangtį.
4 žingsnis
Pakartokite 3 veiksmą aukščiau, kol užpildysite visus petrio indus.
5 žingsnis
Jei neliko PDA, atsargiai išgerkite kolbą su originaliu folijos dangčiu, leiskite jai atvėsti ir sukietėti, užveržkite folijos dangtį ir laikykite šaldytuve.
